Stanični disruptor je često korišten eksperimentalni instrument koji se koristi za razbijanje bioloških stanica i oslobađanje unutarstaničnih tvari.Princip rada razbijača ćelija zasniva se na principu fizičkog lomljenja i mehaničkih oscilacija, a svrha razbijanja ćelija se postiže obezbeđivanjem dovoljno energije za uništavanje strukture ćelija.
Princip rada ćelijskog disruptora će biti detaljno predstavljen u nastavku.Glavne komponente ćelijskog disruptora uključuju regulator brzine, komoru za drobljenje, kuglu za drobljenje i cevovod za uzorke, itd. Među njima, regulator brzine se koristi za kontrolu brzine rotacije komore za drobljenje, koja je kontejner za skladištenje uzorke i kuglice za drobljenje, a kuglice za drobljenje razbijaju ćelije sudarajući se s uzorcima.Prije upotrebe ćelijskog disruptora, prvo treba odabrati odgovarajući medij za ometanje.Uobičajeni mediji za drobljenje su staklene perle, metalne perle i kvarcne perle.
Glavna razmatranja pri odabiru medija za drobljenje su priroda uzorka i svrha drobljenja.Na primjer, za krhke ćelije, manje staklene perle se mogu koristiti za ometanje;za teže ćelije mogu se odabrati tvrđe metalne perle.Tokom procesa drobljenja, stavite uzorak za drobljenje u posudu za drobljenje i dodajte odgovarajuću količinu medija za drobljenje.Zatim, brzinu rotacije komore za drobljenje kontrolira regulator brzine, tako da medij za drobljenje i uzorak imaju kontinuirani mehanički sudar.Ovi sudari mogu poremetiti strukturu ćelije kroz prijenos energije, dezintegraciju ćelijskih membrana i organela i oslobađanje unutarćelijskih materijala.
Radni proces ćelijskog disruptora uglavnom uključuje sljedeće ključne faktore: brzinu rotacije, veličinu i gustinu medija za drobljenje, vrijeme drobljenja i temperaturu.Prva je brzina rotacije.Izbor brzine rotacije treba prilagoditi prema različitim tipovima ćelija i svojstvima uzorka.
Općenito, za meke ćelije može se odabrati veća brzina rotacije kako bi se povećala učestalost sudara i time efikasnije poremetile ćelije.Za tvrđe ćelije, budući da su izdržljivije, brzina centrifuge se može smanjiti kako bi se smanjilo ometanje uzorka.
Drugi je veličina i gustina medija za drobljenje.Veličina i gustina materijala za drobljenje direktno će uticati na efekat drobljenja.Manji disruptivni mediji mogu pružiti više tačaka sudara, što olakšava narušavanje ćelijskih struktura.Veći medij za drobljenje zahtijeva duže vrijeme drobljenja.
Osim toga, gustoća medija za drobljenje također će utjecati na silu sudara, previsoka gustoća može dovesti do pretjerane fragmentacije uzorka.Vrijeme prekida je važan parametar za prekid ćelije.Izbor vremena drobljenja treba odrediti prema vrsti uzorka i efektu drobljenja.Tipično, što je duže vrijeme poremećaja, to su ćelije temeljnije poremećene, ali to također može uzrokovati oštećenje drugih dijelova uzorka.Posljednja je kontrola temperature.Uticaj temperature na ćelijsku fragmentaciju se ne može zanemariti.Previše visoka temperatura može izazvati denaturaciju proteina i nukleinskih kiselina u ćelijama, što utiče na efekat fragmentacije.Stoga se preporučuje izvođenje destrukcije ćelija u kriogenim uvjetima, što se može smanjiti korištenjem čilera ili radom na ledu.
Disruptori ćelija igraju važnu ulogu u biološkim istraživanjima.Razumnom kontrolom parametara kao što su brzina rotacije, veličina i gustina medijuma za drobljenje, vreme i temperatura drobljenja, može se postići efikasno drobljenje ćelija.Nakon što se ćelije razbiju, mogu se dobiti različite vrste supstanci u ćelijama, kao što su proteini, nukleinske kiseline, enzimi itd., što predstavlja važnu pretpostavku za naknadne analize i istraživanja.Ukratko, ćelijski disruptor je važan eksperimentalni instrument, a njegov princip rada se zasniva na principu fizičkog lomljenja i mehaničke vibracije.Efikasno ometanje ćelija može se postići kontrolom različitih parametara kao što su brzina rotacije, veličina i gustina disrupcionog medija, vrijeme prekida i temperatura.Disruptor ćelija se široko koristi, pružajući pogodnost i podršku istraživačima u srodnim istraživanjima u oblasti biologije.
Vrijeme objave: Sep-06-2023